Madala kiiruse tsentrifuugi

A madala kiirusega tsentrifuugiKipsud tsentrifugaaljõu loomiseks, mis eraldab proovi erineva tihedusega komponendid. Rakkude eraldamise ajal eraldatakse rakud, rakkude fragmendid ja muud biomolekulid tsentrifugaaljõu abil erinevatesse kohtadesse, sõltuvalt nende massist ja tihedusest. Täpsemalt, kui proovitoru pööratakse suurel kiirusel tsentrifuugi rootori sees, on segu erinevate komponentide tsentrifugaaljõud võrdeline nende massiga ning seda mõjutab ka pöörlemiskiirus ja raadius. Suuremad rakud või osakesed visatakse tsentrifuugi toru põhja poole, väiksemad komponendid jäävad ülemisse kihti. See tihedusel ja massil põhineva eraldamise põhimõte muudab madala kiirusega tsentrifuugid ideaalseks tööriistaks rakkude eraldamiseks.

● Õige tsentrifugaalkiiruse ja aja valimine: Kiiruse ja aja valimine on rakkude eraldamise tõhususe jaoks ülioluline. Liiga kõrge pöörlemiskiirus võib põhjustada rakkude rebenemist või kahjustusi, samas kui liiga pikk aeg võib põhjustada rakkude agregatsiooni või mittetäielikku sademeid. Seetõttu tuleks tsentrifugaalparameetrite valimist kaaluda vastavalt rakkude tüübile, suurusele ja tihedusele.
● Veenduge valimi saldo: Valimi tasakaal on võti, mis takistab töö ajal tsentrifuugi vibratsiooni ja müra tekitamist. Proovide paigutamisel on vaja tagada, et kõigis tsentrifuugitorudes olevad proovid oleksid võrdsed või sarnased. Kui proovi kvaliteedis on suur erinevus, võib tasakaalu saavutamiseks heledamasse tsentrifuugide torusse lisada sobiva kogus puhvrit või normaalset soolalahust.
● Valige õige tsentrifuugitoru: Tsentrifuugi toru kvaliteet ja tihedus mõjutavad ka olulist mõju rakkude eraldamise tõhususele. Kvaliteetsetel tsentrifugaaltorudel on hea tihendus- ja korrosioonikindlus, mis võib tõhusalt vältida proovi leket ja saastumist. Samal ajal tuleb tsentrifugaaltoru spetsifikatsioon valida ka vastavalt proovi mahule ja vajalikule tsentrifugaaljõule.
● Pöörake tähelepanu tsentrifuugi hooldamisele ja hooldusele: Puhastage regulaarselt tsentrifugaalkamber ja tsentrifuugi rootori, et vältida proovi jäägi saastumist. Pühkige pärast kasutamist õigel ajal puhtaks, et vältida vedelikujääkidest põhjustatud korrosiooni. Samal ajal on vaja regulaarselt kontrollida toitejuhet ja pistikut ning muid tsentrifuugi komponente, et tagada nende puutumine ja vältida ohutusohtusid.

● Rakuravi geenitehnoloogias: Geenitehnoloogias tuleb rakke sageli kultiveerida, transfekteerida, sõeluda ja muid ravimeetodeid. Madala kiirusega tsentrifuugisid saab kasutada selliste etappide jaoks nagu rakususpensioonide kontsentratsioon ja pesemine, samuti rakkude kogumine pärast transfektsiooni. Tsentrifuugimise teel saab eemaldada lisandid ja transfekteerimata rakud rakukultuuri söötmes ning geeni transfektsiooni tõhusust ja puhtust saab parandada.
● Valgu puhastamine ja eraldamine: Valguuuringutes tuleb spetsiifilised valgud puhastada keerukatest bioloogilistest proovidest. Madala kiirusega tsentrifuuge saab kasutada valgulahuste esialgseks selgitamiseks ja lisandite, näiteks rakujääkide, nukleiinhapete jms eemaldamiseks, tsentrifugaalravi abil saab suhteliselt puhast valgulahust, mis loob aluse järgnevate puhastamisetappide jaoks.
● viiruseosakeste eraldamine ja puhastamine: Viiruseosakestel on tavaliselt spetsiifiline tihedus ja suurus ning neid saab eraldada ja puhastada madala kiirusega tsentrifuugidega. Näiteks viroloogia uurimisel saab viiruseosakesi eraldada rakukultuuridest, kasutades diferentsiaalse tsentrifuugimist. See meetod kasutab ära tsentrifugaaljõudude erinevusi erinevatel kiirustel, et eraldada viiruseosakesed teistest rakukomponentidest.
● Bioloogiliste ravimite tootmine ja kvaliteedikontroll: Bioloogiliste ravimite tootmisprotsessis kasutatakse sageli madala kiirusega tsentrifuuge rakukultuuri vedeliku selgitamiseks, rakkude prahi eemaldamiseks ja ravimitoodete esialgseks eraldamiseks. Lisaks saab ravimite kvaliteedikontrollis kasutada ka madala kiirusega tsentrifuuge, et tuvastada selliseid võtmenäitajaid nagu ravimiosakeste suuruse jaotus ja stabiilsus.

◇ Esmane eraldamine: Viiruseosakeste primaarseks eraldamiseks kasutatakse sageli madala kiirusega tsentrifuuge. Viiruse ekstraheerimise protsessis saab vähekiiruse tsentrifuugimisega eemaldada suured osakesed, näiteks raku fragmendid ja lisandid, ja saada võib suhteliselt puhast viiruse suspensiooni. See samm hõlbustab hilisemaid puhastamise etappe.
◇ viiruse rikastamine: Mõnel juhul saab viiruse rikastamiseks kasutada ka madala kiirusega tsentrifuuge. Tsentrifuugi aega ja kiirust reguleerides saab viiruseosakesi ladestada tsentrifuugioru allosas, nii et kontsentreeritud viiruseproovi saab supernatandi ekstraheerimisega. Siiski tuleb märkida, et madala kiirusega tsentrifuugide rikastamise mõju on suhteliselt piiratud ja juhtudel, kus on vaja kõrgpuhustusega viirusi, on tavaliselt vaja ka muid puhastusmeetodeid.

 

● diferentsiaalne tsentrifugaalmeetod: Diferentsiaalne tsentrifugaalmeetod on erineva suuruse ja tihedusega osakeste eraldamise meetod, kasutades erinevaid kiirusi ja tsentrifugaalseid aegu. Erinevat tsentrifuugimist kasutatakse sageli lisandite edasiseks eemaldamiseks ja viiruse koondamise viiruse puhastamise ajal. Pärast suurte osakeste, näiteks organellide eemaldamist madala kiirusega tsentrifuugimisega, sadestatakse viiruseosakesed kiire tsentrifuugimisega.
● Tiheduse gradiendi tsentrifuugimismeetod: Tiheduse gradiendi tsentrifuugimismeetod on erineva tihedusega söötme kasutamine gradiendi moodustamiseks, nii et erineva tihedusega osakesed levitavad gradiendimeetodi erinevatele positsioonidele. Viiruse puhastamise korral kasutatakse tiheduse gradiendi tsentrifuugimist sageli viiruseosakeste eraldamiseks muudest sarnase tihedusega lisanditest (näiteks valgud, nukleiinhapped jne). Valmistades tihedusgradiendi tsentrifuugi torus eelnevalt ja lisades seejärel tsentrifuugimiseks gradiendi pinnale viiruse suspensiooni, settivad viiruseosakesed gradiendi konkreetses asendis, moodustades settetsooni.
● Sademete meetod: Sademete meetod on viiruseosakeste sadestamine, lisades keemilisi reagente. Levinumad sadeivad ained hõlmavad ammooniumsulfaat, polüetüleenglükool (PEG) jne. Sademete meetodit saab kasutada viiruse edasiseks puhastamiseks. Sadestaja kontsentratsiooni ja pH väärtust reguleerides saab viiruseosakesi lisandite eemaldamiseks selektiivselt sadestada.
● filtreerimismeetod: Filtreerimismeetod on meetod viiruseosakeste eraldamiseks muudest lisanditest geelfiltratsiooni kromatograafia veeru abil. Geelifiltri kromatograafiline kolonn eraldatakse vastavalt osakeste suurusele ja suured molekulid voolavad kõigepealt kromatograafilisest kolonnist välja ja väikesed molekulid voolavad hiljem välja. Valides sobivaid geeli- ja kromatograafilisi tingimusi, saab viiruseosakesi tõhusalt eraldada muudest lisanditest.
● Elektroforeetiline meetod: Elektroforeetiline meetod on elektrivälja toimingute kasutamine laetud osakeste valmistamiseks elektrivälja migratsioonimeetodis. Viiruse puhastamise korral kasutatakse sageli elektroforeesi viiruseosakeste eraldamiseks muudest laetud lisanditest. Viiruseosakeste tõhusat eraldamist ja puhastamist saab saavutada sobivate elektroforeesi tingimuste ja söötme valimisel.

Kuum tags: Madala kiirusega tsentrifuug, Hiina madala kiirusega tsentrifuugi tootjad, tarnijad, tehas