HPLC analüüsi rakendamine pöördaurustis

Kõrgsurvevedelikkromatograafiat (HPLC) nimetatakse ka kõrgsurvevedelikkromatograafiaks, kiirvedelikkromatograafiaks, kõrglahutusega vedelikkromatograafiaks ja kaasaegseks kolonnkromatograafiaks. See on tõhus ja kiire analüütiline eraldustehnoloogia, mis töötati kiiresti välja 1970. aastatel ning on oluline vahend kaasaegses eralduskatses.

Kõrgefektiivne vedelikkromatograafia (HPLC) kasutab liikuva faasina vedelikku ja kõrgsurve infusioonisüsteemi, et pumbata liikuv faas, näiteks erineva polaarsusega lahusti või erineva vahekorraga lahusti ja puhverlahuse segamine statsionaarse faasiga kromatograafiakolonni. Pärast kolonnis olevate komponentide eraldamist sisenevad need tuvastamiseks detektorisse, et teostada proovi analüüsi.

Kõrgfektiivse vedelikkromatograafia eraldusmehhanism on sama, mis tavapärase kolonnkromatograafia oma, kuid pakend on peenem ja seda tuleb lükata kõrgsurvepumba abil, millel on kõrge kolonni efektiivsus ja kiire analüüsikiirus. Erinevalt gaaskromatograafiast osaleb vedelikkromatograafias ka liikuv faas komponentide eraldusprotsessis ning selle koostist, osakaalu ja pH väärtust saab paindlikult reguleerida, erinevate eraldusrežiimidega. Praktikas reguleeritakse proovide retentsiooniväärtust ja selektiivsust kromatograafilises kolonnis liikuva faasi koostist muutes, nii et erinevaid proove saab eraldada.

 

HPLC analüüsi komponendid

 

Veerg: kolonn on HPLC-süsteemi põhikomponent, mida kasutatakse proovis olevate ühendite eraldamiseks. Levinud eralduskolonnid on pöördfaasikolonn, ioonvahetuskolonn, geelfiltratsioonikolonn jne ning nende valik sõltub eraldatava ühendi omadustest ja analüüsi eesmärgist.

Mobiilne faas: liikuv faas on lahustite kombinatsioon, mida kasutatakse HPLC-s proovi juhtimiseks läbi eralduskolonni. Liikuv faas koosneb tavaliselt lahustite segust, milleks võib olla üks lahusti või teatud vahekorras mitme lahusti segu. Sobiva voolu valimine on eraldusefekti jaoks väga oluline.

Pump: Pumpa kasutatakse liikuva faasi saamiseks ja selle surumiseks läbi eralduskolonni teatud rõhul. Levinud pumbad hõlmavad konstantse rõhuga pumpa ja gradientpumpa. Gradiendipump võib realiseerida liikuva faasi koostise lineaarse või mittelineaarse muutuse, et saavutada parem eraldusefekt.

Injektor: Injektorit kasutatakse analüüsitava proovi sisestamiseks HPLC süsteemi. Proovivõttur võib olla käsitsi juhitav süstal või automaatne proovivõtja. Tavaliselt on neil täpne maht ja hea korratavus, et tagada proovi täpne süstimine.

Kolonni ahi: Kolonni ahju kasutatakse eralduskolonni temperatuuri reguleerimiseks. Temperatuuri reguleerides saab muuta kolonnis oleva proovi jaotuskoefitsienti ja eralduskiirust, optimeerides nii eraldusefekti.

Detektor: detektorit kasutatakse eraldatud ühendi tuvastamiseks ja selle kontsentratsiooniga seotud elektrisignaali genereerimiseks. Levinud detektorid hõlmavad ultraviolettkiirguse nähtava neeldumise detektorit, fluorestsentsi detektorit ja elektrokeemilist detektorit. Detektori valik sõltub analüüsitava ühendi omadustest ja tuvastamise tundlikkuse nõuetest.

Andmehõivesüsteem: Andmehõivesüsteemi kasutatakse detektori poolt väljastatavate signaalide vastuvõtmiseks, salvestamiseks ja analüüsimiseks. See võib teisendada tuvastatud signaali parameetriteks, nagu piigi pindala ja retentsiooniaeg, ning pakkuda tulemuste analüüsi ja tõlgendamist.

 

Pärast lahusti eemaldamistpöörlev aurusti, on saadud proov tavaliselt kontsentreeritud või tahke. Kui soovite proovis olevaid ühendeid edasi analüüsida või tuvastada, saate neid analüüsida kõrgsurvevedelikkromatograafia (HPLC) abil.

Üldised sammud proovide analüüsimiseks pärast pöördaurustamist HPLC abil

 

1. Proovi lahustamine: lahustage proov pärast pöördaurustamist sobivas lahustis. Lahustite valikul tuleks arvesse võtta analüüsitava aine lahustuvust ja HPLC analüüsitingimuste nõudeid.

2. Standardlahuse valmistamine: Kui on vaja kvantitatiivset analüüsi, võib testitava ühendi standardlahuse valmistada järgnevaks korrigeerimiseks ja analüüsitulemuste arvutamiseks.

3. Tehke HPLC analüüs: süstige proov HPLC süsteemi ja seadistage sobiv eralduskolonn, liikuv faas ja detektor. Vastavalt analüüsi eesmärgile valige sobivad meetodid ja parameetrid, nagu voolukiirus, temperatuur ja gradiendi programm.

4. Andmete kogumine ja analüüs: proovi kromatogramm kogutakse HPLC süsteemiga ja sihtühend kvantifitseeritakse või identifitseeritakse piigi pindala, retentsiooniaja või muude seotud parameetrite järgi. Kvantitatiivseks analüüsiks saab kasutada standardkõvera meetodit ja sisestandardi meetodit.

5. Tulemuste tõlgendamine: Analüüsitulemuste kohaselt hinnati proovis sisalduvaid ühendeid kvalitatiivselt ja kvantitatiivselt. Vastavalt vajadusele saate koostada aruandeid või salvestada analüüsitulemusi.

 

Rotoaurusti kasutamisel HPLC analüüsis on kaks praktilist tähendust

 

• Proovi kontsentratsioon: mõnel juhul võib analüüsitava proovi kontsentratsioon olla liiga madal, mistõttu saab proovi kontsentreerimiseks kasutada keemilist pöördaurustit, et suurendada analüüdi tuvastamise tundlikkust HPLC-s.
• Lahusti eemaldamine: Mõnes proovis võivad lahustid häirida HPLC analüüsi, mistõttu on vaja lahustid proovides eemaldada või asendada HPLC jaoks sobivate lahustitega. Labori pöördaurusti aitab eemaldada lahustit ja muuta proovi HPLC analüüsiks sobivasse vormi.

 

HPLC analüüs japöörlev aurustion kaks keemilises analüüsis sageli kasutatavat tehnikat ning neil on põhimõtteliselt ja rakenduses mõningaid erinevusi ja seoseid.

 

Erinevus

 

Põhimõte: HPLC põhineb vedelikkromatograafia põhimõttel ning eraldamine ja kvantitatiivne analüüs teostatakse statsionaarse faasi (kolonn) ja liikuva faasi (lahusti) vahelise interaktsiooni kaudu. Aurusti kasutab vedela proovi kiireks aurustamiseks ja lahusti eemaldamiseks kuumutamise ja pöörlemise põhimõtet, et proov kontsentreerida või proovi lahustikeskkonda muuta.

Rakendusväli: HPLC-d kasutatakse laialdaselt keemias, farmaatsias, keskkonnas ja muudes valdkondades ning seda saab kasutada komplekssete segude ühendite eraldamiseks, tuvastamiseks ja kvantitatiivseks analüüsiks; Rotatsioonaurustamist kasutatakse peamiselt proovide kontsentreerimise, lahusti eemaldamise ja proovi ettevalmistamise protsessis ning seda kasutatakse tavaliselt orgaanilises sünteesis, looduslike saaduste ekstraheerimises, proovide ettevalmistamises ja muudes valdkondades.

Analüüsi kiirus: HPLC analüüs võtab tavaliselt proovide eraldamiseks ja tuvastamiseks kaua aega, mis võib kesta mitu minutit kuni mitu tundi; Vaakum-pöördaurusti üksus suudab vedelad proovid kiiresti aurustada lühikese aja jooksul, tavaliselt võtab see vaid mõne minuti.

 

Ühendage

 

Proovi ravi: Rotatsioonaurusti seadmeid kasutatakse sageli proovide kontsentreerimiseks või lahustite eemaldamiseks proovi ettevalmistamise ajal, et muuta proove sobivaks edasisteks analüüsimeetoditeks, nagu HPLC. HPLC analüüsi mõju ja täpsust saab parandada proovi kontsentreerimisega ja lahusti eemaldamisega rotaatoraurustiga.

Lahusti valik: HPLC analüüsis on lahusti valik eraldusefekti jaoks väga oluline; Thepöörlev aurustivõib aidata lahusti proovist eemaldada ja muuta proovi HPLC analüüsiks sobivasse vormi. Seetõttu võib rotaatoraurusti pakkuda HPLC analüüsi jaoks rahuldavaid lahustitingimusi.

 

Pakume käsitsi tõstetavat pöörlevat aurustit ja elektrilist tõstetavat pöördaurustit, võtke meiega ühendustsales@achievechem.comkohandada oma pöörleva aurusti masinat.