Klassikaline veerukromatograafia

Klassikaline veerukromatograafia, tuntud ka kui vedela tahke kromatograafia, on lahusti eraldamise meetod, mis põhineb jaotuse erinevusel statsionaarse faasi (tavaliselt tahke adsorbenti) ja liikuva faasi (lahusti) . . põhiprintsiipi saab järgmiselt: fikseeritud faasi abil eraldatakse erinevad lahuse Serined, mis on segud. Jaotuskoefitsiendid fikseeritud faasi ja liikuva faasi . vahel

Kolonnkromatograafias koosneb statsionaarne faas tavaliselt poorsetest tahkete osakeste (näiteks ränidioksiidi geeli, alumiiniumoksiidi, aktiveeritud süsiniku jne .), millel on suur spetsiifiline pindala ja adsorptsioonikeskus, ning võib moodustada vesiniksidemeid lahustunud molekulidega, van der waalsi jõudude ja muude interaktsioonide jaoks {{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{}. Statsionaarsest faasist pärit molekulid ja selle valik tuleks kindlaks määrata vastavalt lahustunud aine polaarsusele ja adsorbendi . adsorptsiooniomadustele

In the separation process, the mixture solution is introduced into the column containing the stationary phase. With the flow of the mobile phase, the components move down the column at different speeds due to the different adsorption capacity of the stationary phase. The more polar components are usually easy to be adsorbed by the stationary phase, so they move slowly. However, the component with weak Polaarsust on mobiilne faas hõlpsasti ära viidud ja liikuva kiirus on kiirem . sel viisil, iga komponent moodustab veerus arvukalt värviribasid, et saavutada eraldamine .

► Tuletisinstrumendi eesmärk
Deerivatiseerimise peamine eesmärk on muuta analüütide füüsikalis -keemilisi omadusi, nii et need sobivad paremini eraldamiseks ja tuvastamiseks kolonnkromatograafiaga . konkreetselt, tuletisinstrumentide töötlemine saavutab järgmised eesmärgid:

1) Täiustatud tuvastamise jõudlus: tutvustades funktsionaalrühmi, mida on lihtne tuvastada, genereerib analüüdi detektorile tugevama signaali, parandades tuvastamise tundlikkust ja täpsust .
2) Muutke molekulaarset struktuuri või polaarsust: reguleerige analüüdi polaarsust, et parandada selle eraldamist kolonnil ja vähendada maksimaalse jälituse ja kattumise .
3) Suurenenud volatiilsus: mõnede mittelenduvate analüütide jaoks võib derivatiseerimine parandada nende volatiilsust, muutes neid gaasikromatograafias . hõlpsamaks eraldamiseks ja tuvastamiseks
4) Stabiilne analüüs: tundlikke funktsionaalrühmi saab derivatiseerimisega kaitsta, et vältida lagunemist või muutust eraldamise ja tuvastamise ajal .

► Tuletisinstrumendi tüüp
Derivatiseerimine jaguneb peamiselt kahte tüüpi: veergieelne derivatiseerimine ja kolonnijärgne derivatiseerimine:

1) kolonnieelne tuletus:
Enne kui analüüdi veeru siseneb, reageerib see keemiliselt tuletistega, et saada tuletisi .
Seejärel eraldatakse derivaadid ja tuvastatakse veerus .
Eelnemni eelneva derivatiseerimisel on vabade reaktsioonitingimuste eelised ja lihtne mitmeastmeline reaktsioon, kuid see võib ka lisandeid või kaotada proovisid .
2) Posti veeru tuletus:
Analüüdid eraldatakse kõigepealt kromatograafilisel veerus ja reageerivad seejärel keemiliselt derivaatide raku . derivaatidega
Saadud tuletised sisestatakse detektorisse tuvastamiseks .

Väärmejärgsel tuletamisel on hea reprodutseeritavuse eelised ja vähem mõjutavad tegurid, kuid see nõuab täiendavaid instrumente ja seadmeid .
► Tuletise töötlemise rakenduse näited
Looduslike farmatseutiliste keemiliste komponentide ekstraheerimisel ja eraldamisel võib see koos tuletisinstrumentide töötlemistehnoloogiaga saavutada järgmised rakendused:

1) Parem tuvastustundlikkus: näiteks aminohapete analüüsis võib hõlpsasti tuvastatavate funktsionaalrühmade (näiteks fluorofooride) kasutuselevõtt veerueelse derivatiseerimise kaudu suurendada detektori aminohapete signaali tugevust, parandades seeläbi tuvastamise tundlikkust.
2) Parandage eraldusafekti: mõnede sarnase polaarsusega või sarnase struktuuriga ühendite puhul saab polaarsust kohandada derivatiseerimisravi abil, nii et kromatograafilise kolonni eraldamise mõju saab parandada ., näiteks flavonoidide analüüsimisel, erinevad funktsionaalsed rühmad {{{{{parandades seega nende poreesity ja parandades nende poreesityt ja parandades nende poreemi ja polaarsust.
3) Tundlike funktsionaalsete rühmade kaitse: tundlikke funktsionaalrühmi sisaldavad analüüdid (näiteks fenoolne hüdroksüül, amino jne .), võib derivatiseerimine kaitsta neid funktsionaalrühmi lagunemise või muutuste eest eraldamise ja tuvastamise ajal. näitena derstimise ajal, mis on devitrization, nende hüdroksüülrühmade ajal soodsas, hüdroksüülrühmade korral võimalik, awety boytyd Awety. eraldamine .