HPLC kolonni kromatograafia
2.kromatograafiline veerg (pöörlemis tüüp)
3.Kromatograafiline veerg (käsiraamat)
*** Ülaltoodud hinnakirjade nimekiri küsige meid, et saada
Kirjeldus
Tehnilised parameetrid
HPLC kolonni kromatograafia, tuntud ka kui kõrgjõudlusega vedelikkromatograafia (suure jõudlusega vedelikkromatograafia) on kolonni vedelikkromatograafia, millel on kõrge eraldamise efektiivsus ja on ka oluline kromatograafia haru.
See eraldab proovis sisalduvad komponendid vastavalt adsorptsioonijõu ja jaotuse koefitsiendi erinevusele fikseeritud faasi ja liikuva faasi vahel. Kõrgsurveinfusioonisüsteem, liikuv faas (tavaliselt üksik lahusti või erineva polaarsusega lahustite segu) pumbatakse statsionaarset faasi sisaldavasse kolonni. Kui proovi iga komponent läbib kromatogrammi kolonni, on statsionaarse faasiga interaktsiooni erineva suuruse ja tugevuse tõttu (näiteks adsorptsioon, jaotus, välistamine, afiinsus), samuti statsionaarses faasis asuv viibimisaeg on erinev, et saavutada iga komponendi eraldamine. Seejärel sisenevad eraldatud komponendid detektorisse tuvastamiseks, saades sellega iga komponendi kvalitatiivse ja kvantitatiivse teabe.
Parameeter
Rakendused farmaatsiaanalüüsis
HPLC kolonni kromatograafia rakendamine ravimite analüüsis
Olulise eraldusanalüüsi tehnoloogiana on kõrgjõudlusega vedelikkromatograafia (HPLC) näidanud farmatseutilise analüüsi valdkonnas suurt rakenduse potentsiaali ja väärtust alates selle kiirest arengust 1970. aastatel. Kombineerides klassikalise vedelikkromatograafia ja gaasikromatograafia eralduspõhimõtted, on HPLC muutunud hädavajalikuks vahendiks ravimite analüüsimisel selle tõhusa eraldamise, kiire analüüsi, suurepärase tuvastustundlikkuse ja laia rakendusevaliku jaoks.
Aluspõhimõtted ja omadused
See kasutab fikseeritud ja liikuvate faaside koostoimet segu erinevate komponentide järk -järgult eraldamiseks. Statsionaarne faas võib olla tahke aine või tahke külge kinnitatud vedelik, samas kui liikuv faas on vedelik või gaas. HPLC -s sunnitakse lahusti läbi kolonni kõrge rõhku kuni sadade atmosfäärideni, parandades oluliselt eraldamise efektiivsust. Erineva eraldusmehhanismi kohaselt võib HPLC jagada normaalfaasi HPLC, pöördfaasi HPLC, ioonvahetuse HPLC ja mahu välistamise HPLC. Igal tüübil on oma spetsiifiline rakenduse ulatus ja eraldusmehhanism, näiteks normaalne faas HPLC, et eraldada analüüdid polaarsusel, ja pöördfaasi HPLC eraldada hüdrofoobsete interaktsioonide abil.
HPLC kolonni kromatograafia omadused kajastuvad peamiselt järgmistes aspektides:
Kõrge eraldamise efektiivsus: HPLC võimaldab tänu kõrgsurve infusioonipumpadele ja suure jõudlusega sammastele tõhusalt eraldada keerulisi segusid.
Kõrge tundlikkus: kaasaegsed detektorid, näiteks ultraviolettkiirguse neeldumise detektorid, fluorestsentsi detektorid, massispektromeetria detektorid jne, on HPLC -l äärmiselt kõrge tuvastustundlikkus.
Lai valik rakendusi: HPLC ei piira proovi volatiilsus ja termiline stabiilsus ning see suudab analüüsida kõrge keemistemperatuuriga termilisi ebastabiilseid füsioloogilisi aktiivseid aineid ja seda pole kerge aurustada.
Kõrge automatiseerimise aste: enamik moodsaid HPLC -instrumente on varustatud automaatse proovivõtja ja andmete töötlejaga, mis suudab realiseerida analüüsi automatiseerimist ja kiiret andmetöötlust.
 |
 |
 |
 |
Spetsiifiline rakendamine ravimite analüüsis
HPLC -d saab kasutada ravimite koostise analüüsiks, et määrata ravimite toimeained ja kahjulikud lisandid. Näiteks Hiina ravimmaterjalide flavonoidide, alkaloidide ja muude toimeainete analüüsi abil saab toimeainete tüübid ja sisu kindlaks määrata, et tagada ravimite kvaliteet ja efektiivsus. Lisaks saab HPLC -d kasutada ka ravimite koostise analüüsimiseks lääne farmaatsiaannuste vormides, näiteks süstimised, tabletid, kapslid jne, et tagada ravimi koostise täpsustamine määratud nõuetele.
HPLC mängib olulist rolli ravimite kontsentratsiooni määramisel. Ravimi sisalduse täpselt määrates saab ravimi ohutuse ja tõhususe tagada. Näiteks antibiootikumiravimite analüüsis saab HPLC -d kasutada ravimi antibiootikumisisalduse määramiseks ravimi antibakteriaalse toime hindamiseks. Lisaks saab HPLC -d kasutada ka ravimite kontsentratsiooni määramiseks organismides nagu plasma, uriin, kude ja muud bioloogilised proovid, et hinnata ravimite tõhusust ja kõrvaltoimeid.
HPLC mängib olulist rolli ka ravimite kvaliteedi hindamisel. Võrreldes ravimite erinevate partiide analüütilisi andmeid, on võimalik hinnata, kas ravimite kvaliteet on stabiilne. Lisaks saab HPLC -d kasutada ka uute ravimite tõhususe ja farmakokineetiliste omaduste uurimiseks, pakkudes teaduslikke aluseid uute ravimite väljatöötamiseks ja turustamiseks. Näiteks uute ravimite väljatöötamise etapis saab HPLC -ga kindlaks määrata uute ravimite imendumise, jaotuse, metabolismi ja eritumist loomadel, et mõista uute ravimite tõhusust ja farmakokineetilisi omadusi ning pakkuda tugevat tuge uute ravimite kliiniliste uuringute ja turunduse rakendustele.
Kiraalsed ravimid viitavad kiraalsete keskustega ravimite molekulidele ja nende enantiomeerid võivad in vivo aktiivsuses, ainevahetus ja toksilisus märkimisväärselt erineda. Seetõttu on kiraalsete ravimite enantiomeeride isoleerimine ja määramine suur tähtsus. See kromatograafia mängib olulist rolli kiraalsete ravimite analüüsis. Tutvustades kiraalset statsionaarset faasi või kiraalset liikuva faasi lisaainet, saab kiraalsete ravimite enantiomeerid eraldada ja tõhusalt kindlaks määrata. Näiteks optiliselt aktiivsete aminohapete ravimite puhul saab selle kromatograafia abil eraldada erinevad enantiomeerid, et hinnata ravimi bioloogilist aktiivsust ja toksilisust.
Looduslikud ravimid pärinevad paljudest keerukate kompositsioonidega allikatest ja võivad sisaldada mitmesuguseid bioaktiivseid ühendeid. Kolonnkromatograafia mängib olulist rolli looduslike ravimite analüüsis. Kromatograafiliste tingimuste optimeerimisega ja sobiva liikuva faasi valimisega saab realiseerida aktiivsete komponentide tõhusat eraldamist ja määramist looduslikes ravimites. Näiteks kasutati seda kromatograafia meetodit Hiina ravimtaimede, näiteks flavonoidide ja saponiinide aktiivsete komponentide eraldamiseks ja määramiseks, nende tüüpide ja sisu mõistmiseks ning Hiina taimsemeditsiini kvaliteedikontrollile, väljatöötamisele ja kasutamisele tugeva tuge pakkumiseks.
HPLC kolonni kromatograafia eelised ja väljakutsed ravimite analüüsimisel
Kromatograafilisel meetodil on eelised kõrge eraldamise efektiivsuse, kõrge tundlikkuse, laialdase rakenduse vahemiku ja kõrge automatiseerimise aste ravimite analüüsis. Kuid praktilises rakenduses seisab see silmitsi ka mõnede väljakutsetega. Näiteks on valimi eeltöötlus väga nõudlik, et tagada valimi puhtus ja stabiilsus; Kõrged analüütilised kulud, sealhulgas instrumentide omandamine, hooldus, kromatograafiline ja liikuv faasitarbimine; Lisaks ei pruugi HPLC mõne tugeva polaarsusega või suure molekulmassiga komponentide puhul olla võimeline täielikult eraldama ega halvasti tuvastama. Seetõttu tuleks praktilistes rakendustes valida kõige sobivam analüüsimeetod vastavalt konkreetsete ravimite kvaliteedinõuetele ja tegelikule olukorrale.
Tulevikuväljavaade
Teaduse ja tehnoloogia edenemisega ning suure jõudlusega vedelikkromatograafiatehnoloogia arendamisega on selle rakendamine ravimite analüüsis lai. Ühest küljest laiendab uute statsionaarsete faasi materjalide väljatöötamine oluliselt suure jõudlusega vedelikkromatograafia rakendusvahemikku ning parandab eraldamise tõhusust ja selektiivsust. Teisest küljest on HPLC instrumendid intelligentsemad ja automatiseeritud, jälgides veeru olekut reaalajas integreeritud andurite kaudu, võimaldades ennustavat hooldust, seisakuid vähendades ja katseprotsesse optimeerides. Lisaks suudab süsteem koos suurandmete analüüsi tehnoloogiaga reguleerida tööparameetreid, et see vastaks erinevate proovide parimatele eraldamistingimustele, parandades tulemuste eksperimentaalset efektiivsust ja usaldusväärsust. Need edusammud pakuvad tõhusamaid, täpsemaid ja usaldusväärsemaid analüütilisi analüütilisi vahendeid ravimite analüüsimiseks, põhjustades ravimite avastamise ja kvaliteedikontrolli väljatöötamist.
Kokkuvõtlikult on selline kromatograafia oluline roll ravimite analüüsis ja sellel on laialdased rakenduse väljavaated. Pidevalt optimeerides kromatograafilisi tingimusi, valides sobivad mobiilsed ja statsionaarsed faasid, tutvustades uusi avastamistehnoloogiaid ja seadmeid, parandades veelgi selle täpsust ja usaldusväärsust ravimite analüüsimisel ning pakkudes võimsamat tuge ravimite väljatöötamisel, kvaliteedikontrollil ja kliinilistel ravimite kasutamisel.
Teenete ja demerits
Eelis
Tõhus eraldamine
HPLC kolonni kromatograafia kasutab kõrgsurve infusioonipumpa ja kõrge efektiivsusega statsionaarset faasi, mis muudab kolonni efektiivsuse palju kõrgemaks kui klassikalise vedelikkromatograafia ja võib realiseerida keerukate segude tõhusat eraldamist.
Kõrge tundlikkus
Varustatud kõrge tundlikkuse detektoritega, näiteks ultraviolettdetektorid, fluorestsentsi detektorid jne, suudab tuvastada proovide madalaid kontsentratsioone, mis on eriti oluline jälitussanalüüsi jaoks.
Laialdaselt kasutatav
Seda ei piira proovi volatiilsus ja termiline stabiilsus ning see võib analüüsida orgaanilist ainet kõrge keemistemperatuuriga, halva termilise stabiilsuse ja suure suhtelise molekulmassiga ning sellel on lai valik rakendusi.
Hea valik
Mobiilset faasi on mitmesuguseid ja eraldamise selektiivsust saab parandada, muutes liikuva faasi tüüpi ja koostise, et täita erinevate proovide analüütilisi nõudeid.
Kõrge automatiseerimise aste
Enamik moodsaid HPLC -instrumente on varustatud automaatse proovivõtja ja andmetöötlejaga, mis suudab realiseerida analüüsi automatiseerimist ja parandada analüüsi tõhusust.
Proovide taastamine on lihtne
Pärast veeru läbimist ei hävitata valimit ja ühe komponendi saab koguda või ette valmistada, mis on mugav järgnevate katsete või rakenduste jaoks.
Puudus
Vedelikkromatograafide hinna- ja igapäevased hoolduskulud on kõrged, sealhulgas kolonnide asendamine, liikuv faasi tarbimine ja instrumendi regulaarne kalibreerimine.
Ehkki klassikaline vedelikkromatograafia kui kiirem, on HPLC analüüsi ajad gaasikromatograafiaga võrreldes suhteliselt pikad, eriti keerukate proovide eraldamiseks ja analüüsimiseks.
Ehkki HPLC instrumendid on väga automatiseeritud, nõuavad instrumentide töö ja hooldus siiski teatavat teadmisi ja kogemusi. Lisaks võib proovide eeltöötlus olla keeruline.
Mõnede ühendite statsionaarses faasis pöördumatu adsorptsiooni tõttu ei saa neid ühendeid tõhusalt tuvastada, mõjutades seega analüüsi täpsust.
LC eraldamist mõjutab sageli kolonni temperatuur ja korduvate tulemuste saamiseks tuleb säilitada järjepidevaid temperatuuritingimusi, mis suurendab katse keerukust ja kulusid.
Ettevaatusabinõud ravimite sisalduse määramisel
 |
 |
 |
Sellel meetodil on palju ettevaatusabinõusid ravimite sisalduse määramiseks, mis on väga oluline, et tagada määramise tulemuste täpsus ja usaldusväärsus. Siin on mõned peamised kaalutlused:
Kolonni erinevus mõjutab ravimi peetumiskäitumist, isegi kui kolonni pikkus, sisemine veeru suurus sisemine kolonni suurus, täiteaine erinevate omaduste tõttu, võivad ravimi peetumisaeg ja tipptüüp olla väga erinev. Seetõttu tuleks sobiv veerg valida vastavalt ravimi omadustele ja eraldusvajadustele.
Kolonni tuleks regulaarselt säilitada, et vältida saastumist ja ummistust, et tagada selle hea eraldusvõime.
Liikuva faasi puhversoola pH mõjutab märkimisväärset mõju ravimite peetumiskäitumisele ja see võib isegi muuta mõne ravimi tipptasemel järjekorda. Seetõttu tuleks liikuva faasi optimeerimisel erilist tähelepanu pöörata puhversoola pH väärtusele.
Liikuva faasi koostis mõjutab ka ravimi eraldamise mõju. Näiteks multivitamiinipreparaatide määramisel mõjutavad naatriumheksaansulfonaadi ja naatriumheptaansulfonaadi suhtelise suhte muutused liikuvas faasis iga komponendi peetumisaega ja piigi kuju. Seetõttu tuleks sobiv liikuv faasi koostis valida vastavalt ravimi olemusele ja analüütilistele vajadustele.
Proovi käitlemise protsess peaks tagama proovi esindavuse ja stabiilsuse, et vältida proovi lagunemist või saastumist töötlemise ajal.
Proovi kaalumisel tuleks kaalumise täpsuse tagamiseks kasutada lisaainet seda korraga oma kohale kaalumiseks. Samal ajal tuleks lekke vältimiseks standardiseerida.
Võrdluse aine kvaliteet mõjutab otseselt sisu määramise tulemust. Seetõttu tuleks valida usaldusväärse ja täpse sisu kvaliteet.
Kontrolltooteid tuleks halvenemise või saastumise vältimiseks vajalikuks säilitada. Kui kontrollprodukti hoitakse külmkapis, tuleks see enne kaalumist soojendada kuivatusahjus.
Sobiva detektori tüüp tuleks valida vastavalt ravimi- ja analüütiliste vajaduste olemusele, näiteks ultraviolett -detektor, fluorestsentsdetektor jne.
Detektor tuleks perioodiliselt kalibreerida, et tagada selle mõõtmistulemuste täpsus.
Mõõtmisandmete mõistlik statistiline analüüs tulemuste usaldusväärsuse ja korratavuse tagamiseks. Näiteks saab mõõtmistulemuste täpsuse hindamiseks arvutada tipppindala suhtelise standardhälbe (RSD).
Sisu arvutamisel tuleks kasutada selliseid usaldusväärseid meetodeid nagu välised või sisestandardid ning tagada tuleks standardkõvera lineaarsus.
Uue sisu määramise meetodi loomisel tuleks läbi viia metoodiline kontrollimine, sealhulgas spetsiifilisus, lineaarsus, ulatus, täpsus, täpsus, vastupidavus ja nii edasi.
Metodoloogiline kontrollimine on oluline vahend, et tagada mõõtmismeetodi teaduslik, mõistlik ja usaldusväärne.
Veenduge, et instrument püsib analüüsiprotsessi ajal stabiilsena, eriti mitme-pin-analüüsi tegemisel, pöörake tähelepanu sellele, kas instrumendi reageerimise väärtus ja tippkuju on stabiilsed.
Kui analüüsiprotsessi käigus ilmnevad ebanormaalsed andmed, tuleks need hoolikalt kontrollida ja kõrvaldada ning vajadusel uuesti analüüsida.
Kuum tags: HPLC kolonni kromatograafia, Hiina HPLC kolonni kromatograafia tootjad, tarnijad, tehas
Järgmise
Gravitatsioonikromatograafia veerudKüsi pakkumist
